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항원과 항체의 측정의 차이에 따라 직접 방법, 간접 방법, 이중 항체 샌드위치 방법 (직접, 간접), 경쟁 억제 방법 (직접, 샌드위치 등), 포획 방법 등과 같은 많은 자동 ELISA 측정 방식이 있습니다. 임상 실험실에서 일반적으로 사용되는 ELISA 측정 모드에는 이중 항체 샌드위치 방법, 간접 방법, 이중 항원 샌드위치 방법, 경쟁 억제 방법 및 포획 방법이 포함됩니다.

항원의 결정에서, 단백질 거대분자 항원의 측정을 위해 가장 일반적으로 사용되는 방식은 이중 항체 샌드위치 방법이다. 단일 에피토프만을 갖는 소분자의 경우, 경쟁적 억제 방법이 사용된다; 항체 결정은 보통 간접적 방법, 이중 항원 샌드위치 방법, 경쟁적 억제 방법 및 포획 방법을 사용한다.

1. ELISA 워크 스테이션의 이중 항체 샌드위치 방법

For macromolecular proteins containing multiple epitopes, the ELISA 워크 스테이션 uses the double antibody sandwich method to determine it is quite simple. The existing commercial kits for measuring protein antigens basically all adopt this measuring mode.

The first full-automatic ELISA kits for double-antibody sandwich detection of antigens all adopted the "two-step method." Later, in order to shorten the detection time and simplify the operation steps, reagent manufacturers gradually introduced the "one-step" 의료 테스트 키트.

현재 임상 실험실에서 HBsAg, 알파-페토 단백질 (α-페토 단백질, αFP), 전립선 특이 항원 (PSA), CA 시리즈 마커, hCG 및 호르몬 등과 같은 거대 분자 항원의 결정은 기본적으로 한 단계 방법을 사용합니다. 2 단계 방법과 비교하여 1 단계 방법은 조작이 간단하지만 고유 한 단점이 있습니다. 잘 처리되지 않으면 이중 항체 샌드위치 면역 분석 결과는 후크 효과의 존재로 인해 거짓 음성 또는 낮은 정량적 결과가 될 것입니다.

2. ELISA 워크 스테이션의 경쟁법 테스트

Small molecule haptens such as digoxin, theophylline and other drugs and hormones such as T3, T4, and testosterone may have only one epitope. Or because the molecule is too small, after binding to one antibody, it cannot bind to another antibody due to steric hindrance, so the double-antibody sandwich method cannot be used for measurement. The ELISA 워크 스테이션 can only use the competitive inhibition method.

이 분석 모드에서, 작은 분자와 효소의 조합이 얻어질 필요가 있다. 소분자 효소 접합체의 제조는 항체 효소 접합체의 제조만큼 간단하지 않으며, 그것의 정제 또한 매우 어렵다. 소분자 결합 효소와 자유 효소의 분자량 차이는 작고, 일반적인 분자체를 사용하여 분리하기가 어렵다. 따라서 일부 사람들은 디-또는 멀티 머 소분자의 합성을 기반으로 작은 분자를 결정하기 위해 이중 항체 샌드위치 경쟁 ELISA 방법을 확립하려고합니다. 결정의 민감도 및 특이성이 개선되었다.

3. ELISA 워크 스테이션에서의 항체 결정의 간접적 인 방법

Measure the antibodies produced by the body against pathogen antigens of infectious diseases, and the same is true for the 항체 테스트 키트. 고순도 및 잘 정의된 항원을 얻기 어렵기 전에, 또는 항원이 더 복잡한 경우에는, 일반적으로 간접적인 방법이 사용된다.

오늘날 C 형 간염 바이러스 항체 (항-HCV) 의 일반적으로 사용되는 임상 시험 항목은 모두 간접적 인 방법이며 간접 방법은 항체를 검출하는 데 사용됩니다. 엄밀히 말하면, 항체의 IgG 부류만이 측정되고, IgM 및 IgA 부류는 관련되지 않는다. 이는 효소-표지된 2 차 항체에 의해 결정된다. 현재, 일부 특정 IgIII 항체 검출 키트는 간접 방법을 채택한다.

4. ELISA 워크 스테이션의 이중 항원 샌드위치 방법

The antibodies measured by the double antigen sandwich method include all types of specific antibodies, and are not interfered by non-specific IgG. Therefore, the sensitivity and specificity of the double antigen sandwich method to detect antibodies are higher than the indirect method. At present, in order to improve the sensitivity of antibody determination, the kit of the ELISA 워크 스테이션 has basically adopted the double-antigen sandwich method, except that anti-HCV is more complicated due to its antigen.

5. ELISA 워크 스테이션의 경쟁법

The determination of antibodies generally does not use a competition method. When the impurities in the antigen are difficult to remove or the binding specificity of the antigen is unstable, the ELISA 워크 스테이션 can use this mode to determine antibodies. The most typical example is the determination of hepatitis B virus core antibody (HBcAb) and hepatitis B virus e antibody (HBeAb).