ELISA 워크 스테이션의 테스트는 높은 민감도와 우수한 특이성으로 인해 임상 적으로 널리 사용되었습니다. 그러나, 동작에서의 각각의 링크는 테스트의 검출 효과에 더 큰 영향을 미친다. 주의를 기울이지 않으면 불완전한 색상 렌더링, 패턴 화 및 기타 결과로 이어질 수 있습니다. 우리는 다음과 같이 작업의 각 링크에서 자주 발생하는 문제의 원인과 해결책을 요약하여 영감을주고 실험의 품질을 향상 시키기를 희망합니다.
Ⅰ. 완전 자동화 된 ELISA 용 시약 선택
고품질 탐지 시약을 선택하십시오.완전 자동화 된 ELISA지침에 따라 엄격하게 작동합니다. 수술 전에 시약을 실온에서 30-60 분 동안 평형화하십시오.
Ⅱ. 완전 자동화 된 ELISA의 샘플 로딩
1. 가능한 이유:
(1) 혈청 또는 혈장 샘플의 분리가 좋지 않으면 샘플을 추가하십시오.
(2) 수동 조작에서 너무 많은 샘플 플레이트는 샘플을 인큐베이터에 넣기 전에 대기 시간이 너무 길어집니다 (특히 실내 온도가 높을 때).
(3) 샘플을 첨가하고 효소 시약을 첨가한 후, 효소가 구멍에서 튀어나왔다.
2. 해결책:
(1) 표본은 혈청입니다: 1-2 시간 동안 자연적으로 혈액을 저장 한 다음 3000 rpm에서 15 분 동안 원심 분리하는 것이 가장 좋습니다.
표본은 혈장입니다. 항응고제를 함유 한 혈액 표본 수집 튜브를 사용해야하며 혈액 수집 관은 혈액 수집 직후 5-10 번 뒤집어서 혼합해야합니다. 일정 시간 후, 3000 rpm에서 15 분 동안 원심분리한다.
며칠 이내에 테스트 한 경우 2-8 ° C의 냉장고에 보관할 수 있으며 보관해야하는 경우-20 ° C의 저온 냉장고에 넣을 수 있습니다.
(2) 샘플을 첨가한 후에 시료를 인큐베이터에 제 시간에 넣는다.
(3) 효소 시약을 첨가한 후, 마이크로티터 플레이트의 표면을 흡수지로 닦아 건조시킨다.
(4) AT 또는 기타 자동 샘플 첨가를 사용하는 경우 효소 시약을 첨가하기 위해 FAME 또는 기타 후처리 도구를 선택하는 것이 가장 좋습니다.
(5) 많은 표본이있을 때 일괄 처리하십시오.
III. 완전 자동화 된 ELISA의 배양
1. 가능한 이유:
(1) 배양 중에는 덮개 나 덮개가 없으므로 표본 또는 희석제가 증발하여 구멍의 벽에 흡착되어 철저히 청소하기가 어렵습니다.
(2) 인큐베이션 시간이 인위적으로 연장되어, 반응 주변에 비특이적 결합이 잘 되어, 철저하게 세척하기가 어렵다.
2. 해결책:
(1) 커버 시트 또는 커버 부착;
(2) 지침에 따라 작동 시간을 엄격하게 제어합니다.
IV. 완전 자동화 된 ELISA의 세척 판
1. 가능한 이유:
(1) 판을 수동으로 씻으면 액체가 구멍 사이를 교차합니다.
(2) 반자동 플레이트 와셔를 사용하여 판을 씻을 때 세척액의 양이 부족하여 판 세척이 불완전합니다. 플레이트 세척 바늘의 막힘은 불완전한 흡입을 유발합니다. 열악한 플레이트 세척은 플레이트 세척 효과가 좋지 않습니다.
(3) 반응 플레이트가 너무 많으면 세척 플레이트를 기다리는 시간이 길어집니다.
2. 해결책:
(1) 로션이 구멍을 채우고 세척 바늘이 막히지 않았는지 확인하십시오. 접시를 씻은 후에는 흡수성 종이에 부드럽게 두드리는 것이 가장 좋습니다 (깨끗하고 먼지가 적은 흡수성 물질을 선택하십시오).
(2) 합리적으로 배치하거나 더 많은 플레이트 와셔를 사용하십시오.
Ⅴ. 완전 자동화 된 ELISA의 색상 개발
1. 가능한 이유:
(1) 개발자는 준비 후 너무 오래 방치되었거나 만료 된 개발자를 사용했습니다.
(2) 개발자가 추가되면 구멍에서 튀어 나와 액체가 다시 흐릅니다.
2. 해결책:
(1) 가능한 한 사용하기 전에 색상 개발자를 준비해야하며 만료 된 색상 개발자를 사용하지 않아야합니다. 하늘색 TMB 컬러 개발자는 사용되지 않습니다.
(2) 샘플을 추가 할 때 개발자가 흘러 나오지 않도록하십시오.
(3) A와 B 액체는 금속 장비와의 접촉을 피해야합니다.
선조. 완전 자동화 된 ELISA 종료
가능한 원인: 예를 들어 정지 솔루션을 추가 할 때 더 많은 거품이 생성되어 오탐이 증가합니다. 따라서 정지 솔루션을 추가 할 때 기포를 피하십시오.
Ⅶ. 완전 자동화 된 ELISA의 플레이트 판독
플레이트를 읽을 때 플레이트의 바닥이 깨끗하지 않은 경우 마이크로 티터 플레이트가 깨끗한 지 확인하십시오. 따라서 전체 작동 과정에서 ELISA 플레이트가 차아 염소산과 접촉하지 않도록하고 가능한 한 완전 자동 ELISA 테스트 표준의 자동화를 실현하십시오. 효과적으로 테스트의 품질을 향상시킵니다. 게다가 자격을 갖춘 ELISA를 선택하는 것이 중요합니다.워크스테이션 공급 업체.
실제 작업에서는 우수한 시약을 선택하는 것 외에도 작업 단계를 엄격하게 따라야합니다. 동시에, 우리는 실내 품질 관리 및 외부 품질 평가에서 잘해야하며 엄격한 작업 스타일로 각 표본을 검사하여 검사의 품질을 보장해야합니다. 오늘날 중국의 상당수는 완전 자동화 된 마이크로 플레이트 리더를 보유하고 있으며, 이는 완전 자동화 된 ELISA 표준화 된 테스트를 실현하고 테스트 품질을 향상시키는 데 중요한 역할을했습니다.
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